《应用昆虫学报》

文章标题:苜蓿夜蛾保幼激素酯酶cDNA的克隆、序列分析及表达研究

文章作者:张 欢** 郭博智 樊 东***
关 键 词:苜蓿夜蛾,保幼激素酯酶,克隆,序列分析,表达
文章摘要:

【目的】 研究苜蓿夜蛾Heliothis viriplaca保幼激素酯酶(Juvenile hormone esteraseJHE)的功能和作用机理。【方法】 本试验提取苜蓿夜蛾的总RNA,并利用RT-PCRRACE技术扩增得到苜蓿夜蛾保幼激素酯酶基因的全长cDNA序列命名为HvjheGenBank登录号:JQ901384)。【结果】 该基因含有3 106 bp,包括一个1 746 bp的开放阅读框,编码一个含581个氨基酸的多肽,分子量约为63.9 ku多肽的等电点为5.11氨基酸序列具含有5个保幼激素酯酶特有的氨基酸保守模块。推导的氨基酸序列与烟芽夜蛾Heliothis virescens和棉铃虫Helicoverpa armigera中获得的保幼激素酯酶相似性较高,分别达到83%82%荧光定量PCR结果表明,该基因在苜蓿夜蛾不同发育时期和不同组织中都有mRNA水平的特异性表达,且在预蛹期表达量相对较高,取食期、蛹期期和成虫期表达量相对较低;在中肠和脂肪体内的表达量相对于其它组织较高。该基因在大肠杆菌Escherich coli表达系统中进行了诱导表达,经SDS-PAGEWestern blot检测结果表明表达出与预测的蛋白分子量相符的融合蛋白。【结论】 研究结果表明本试验获得了苜蓿夜蛾中一个新的保幼激素酯酶基因的cDNA序列