文章标题：飞蝗CYP408B1和CYP409A1基因的原核表达

文章作者：高翠娥** 任晓宇 张学尧 张婷婷 张建珍 马恩波 吴海花***
关 键 词：飞蝗，细胞色素P450，Real-time PCR，RT-PCR，原核表达
文章摘要：

【目的】 细胞色素P450是分布极其广泛的超家族酶，在昆虫内源及外源化合物代谢中发挥着重要的作用。本文分析了飞蝗Locusta migratoria CYP408B1和CYP409A1基因在不同组织部位的表达差异，并对两种蛋白进行原核表达，为其分子特性和生物学功能的深入研究提供基础资料。【方法】 提取飞蝗5龄若虫不同组织部位的总RNA，体外反转录成cDNA，采用Real-time PCR和RT-PCR技术分析飞蝗CYP408B1和CYP409A1在不同组织部位的表达模式，构建表达载体pCW/CYP408B1、pCW/CYP409A1和pAC/CPR，将pCW/CYP408B1和pCW/CYP409A1分别与pAC/CPR在大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）中进行共表达。【结果】 通过PCR检测，发现CYP408B1和CYP409A1在飞蝗5龄若虫触角、脑、视叶、咽下神经节、胸神经节和附腺中均有表达，其中CYP408B1在附腺中表达量较高。原核表达结果显示，CYP409A1和CPR（NADPH细胞色素P450还原酶）均可表达，蛋白分子量分别约为58 ku和77 ku，但均为包涵体，而CYP408B1未能成功表达。【结论】 本文揭示了飞蝗CYP408B1和CYP409A1在不同组织部位的表达模式，并对YP409A1和CPR进行了原核表达，研究结果为深入探讨飞蝗细胞色素P450基因对杀虫剂的代谢解毒作用提供了实验依据和基础资料。