文章标题：基于RNA-Seq分析Ras1CA在家蚕后部丝腺过表达对细胞周期通路基因的影响

文章作者：马 倩1, 2** 马 俐2 李 胜2 李 恺1***
关 键 词： 转录组学，转基因家蚕，Ras1CA过表达，细胞周期基因
文章摘要：

【目的】 本文旨在挖掘野生型家蚕Bombyx mori和Ras1CA过表达转基因家蚕后部丝腺中的转录本差异，分析和验证细胞周期通路中的差异表达基因，从而探讨Ras1CA过表达转基因家蚕提高蚕丝产量的分子机制。【方法】 利用转录组学比较野生型和Ras1CA过表达转基因家蚕后部丝腺中的基因转录本差异，经实时荧光定量PCR（qRT-PCR）验证。【结果】 野生型家蚕和Ras1CA过表达转基因家蚕后部丝腺组织中有2 636个差异表达基因，其中细胞周期信号通路中有42个差异表达基因，包括细胞周期依赖性激酶（CDK）、细胞周期素（Cyclin）以及转录因子等。通过qRT-PCR检测cdk1、cyclinD1、cyclinD2、cdc7、cdh1、dp-1,2等6个基因在野生型和Ras1CA过表达转基因家蚕后部丝腺组织中的相对表达量，发现转基因家蚕中的表达量均显著高于野生型（P<0.05），其中cyclinD2的表达差异极显著（P<0.01）。qRT-PCR结果与转录本差异一致，表明Ras1CA过表达后，能够促进细胞周期通路基因的表达。【结论】 野生型家蚕和Ras1CA过表达转基因家蚕后部丝腺中有大量差异表达基因，且Ras1CA能够在转录水平上调控细胞周期通路，影响后部丝腺组织的细胞分裂和器官生长，从而促进蚕丝蛋白的合成。