文章标题：棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达分析

文章作者：王亚楠1, 2** 钟 丰1 魏纪珍1 谢丙堂1 张万娜1 陈利珍2*** 梁革梅1*
关 键 词：棉铃虫，Polycalin基因，表达，Bt
文章摘要： 【目的】 通过对棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达谱分析，进一步明确Polycalin基因在抗性中发挥的作用，为棉铃虫Helicoverpa armigera的抗性治理提供理论依据。【方法】 通过RACE结合PCR技术克隆获得了棉铃虫Polycalin基因的全长序列，利用实时荧光定量PCR技术测定了在棉铃虫不同发育时期、幼虫肠道不同部位的Polycalin基因表达量，比较了棉铃虫取食含Cry1Ac蛋白的饲料后，Polycalin基因表达量的变化。【结果】 该基因全长序列为2 955 bp，开放阅读框为2 781 bp，编码926个氨基酸（GenBank登录号为P100652）；预测蛋白的分子量为101.68 ku，等电点为4.57。推导的氨基酸序列中，N末端含有20个氨基酸组成的信号肽，含有8个O-糖基化位点，3个N-糖基化位点，C末端存在2个GPI结合位点。Polycalin在棉铃虫所有发育阶段都可以表达，幼虫期表达量较高，尤其在1~3龄幼虫体内表达量最高，在卵、成虫和蛹中的表达量较低。棉铃虫4龄幼虫取食含活化Cry1Ac蛋白的人工饲料后，Polycalin基因的表达受到抑制。【结论】 研究结果可以为进一步揭示Polycalin基因的功能及其在Bt杀虫机制中的作用奠定基础。