文章标题：家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂20的表达特征分析

文章作者：张学义** 于 皓 张小娟 朱保建 魏国清钱 岑 刘朝良 王 磊***
关 键 词：家蚕，丝氨酸蛋白酶抑制剂，诱导表达，表达分析
文章摘要：

 【目的】  原核表达家蚕Bombyx mori丝氨酸蛋白酶抑制剂20（Serine proteinase inhibitor 20，BmSerpin-20），分析BmSerpin-20基因和蛋白组织表达分布特点，以及不同外源病原物刺激家蚕后BmSerpin-20基因的表达模式。【方法】 利用pET-28a表达载体在大肠杆菌Transetta(DE3)中融合表达BmSerpin-20蛋白，利用纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，利用实时定量PCR技术及Western blot方法分别分析BmSerpin-20基因和蛋白的组织表达水平，以及病原物免疫刺激后的表达模式。【结果】  在大肠杆菌中正确表达和纯化了融合BmSerpin-20蛋白，并制备了多克隆抗体；BmSerpin-20基因和蛋白在脂肪体、中肠、血细胞、马氏管、表皮、睾丸、卵巢中均有表达，且在表皮中表达量最高；家蚕5龄幼虫经核型多角体病毒（Nuclear polyhedrosis viruses）、藤黄微球菌Micrococcus luteus、大肠杆菌Escherichia coli、白僵菌Beauveria bassiana处理后，BmSerpin-20基因表达量先下调而后上调, 但不同病原物在不同时间的影响不尽相同。【结论】  研究了BmSerpin-20基因和蛋白的表达模式，为下一步研究其在家蚕免疫系统中的作用奠定了基础。