文章标题：昆虫小器官RNA荧光原位杂交技术

文章作者：陈 敏** 唐文倩 沈 杰 王 丹***
关 键 词：翅芽，RNA原位杂交，基因表达与调控，trithorax，optomotor-blind
文章摘要：

 【目的】 在昆虫基因表达和功能研究中，RNA原位杂交技术越来越受到青睐。该技术不仅能定性定量反应基因表达的时空特异性，而且能在细胞水平上检测基因表达的调控模式。为了将该技术更好地在昆虫小器官研究中运用，我们以果蝇幼虫翅芽为例优化了改技术。【方法】 解剖果蝇3龄幼虫翅芽进行原位杂交实验。【结果】 我们发现影响原位杂交结果的因素十分复杂，包括取材时期，探针的合成，预杂交/杂交的时间和温度，清洗时间，适当的对照等。通过RNA荧光原位杂交实验，我们揭示了调控细胞记忆的trithorax基因在3龄翅芽广泛表达，并且受到转录因子Optomotor-blind的负调控。【结论】 这一技术方法为研究昆虫小器官的基因表达和调控提供了便捷手段。