《应用昆虫学报》

文章标题:利用28S rDNA种特异引物鉴定新菠萝灰粉蚧

文章作者:黄蓬英1** 林凌鸿2 方志鹏1 林玲玲1 廖富荣1
关 键 词:新菠萝灰粉蚧,粉蚧,种特异引物,分子检测,快速鉴定
文章摘要:

【目的】 新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes Beardsley是近年来口岸中经常截获的检疫性有害生物,其与近似种形态差异小,极易随进境果蔬及种苗传播蔓延,但却难以快速准确鉴定。方法 以新菠萝灰粉蚧为靶标,进境水果中常截获的其他6种粉蚧为对照,利用扩增粉蚧的28S rDNA通用引物扩增7种粉蚧基因部分序列,同时应用Primer Premier 5软件设计新菠萝灰粉蚧28S rDNA种特异引物1对(D.neo-28SF/R)。结果 获得了新菠萝灰粉蚧及其他6种粉蚧的28S rDNA基因部分序列;种特异引物(D.neo-28SF/R)能稳定扩增出片段大小为235 bp条带,且该引物只对新菠萝灰粉蚧具有扩增能力,对其他6种粉蚧不具有扩增效果;对不同寄主来源新菠萝灰粉蚧亦具有同样的扩增效能。结论 利用基于28S rDNA种特异性PCR方法,建立了新菠萝灰粉蚧快速分子检测技术。该技术方法完全可用于新菠萝灰粉蚧的准确识别,对有效阻截其进一步扩张蔓延具有重要实践意义。