文章标题：美国白蛾核型多角体病毒增殖和保存的影响因素

文章作者：胡天义，孙丽昕，郭同斌，王 新，周晓宇，赵正萍，耿薏舒，郝德君
关 键 词：美国白蛾；核型多角体病毒；病毒增殖；保存；杀虫剂
文章摘要：

【目的】 明确美国白蛾核型多角体病毒（Hyphantria cunea nudeopolyhedroviurs，HcNPV）的最佳增殖方法和最适保存条件，为HcNPV标准化生产提供理论依据和技术支撑。【方法】 利用活体增殖法，探究不同饲毒虫龄-病毒浓度组合、持续饲毒时间、幼虫饲毒温度和密度对HcNPV增殖量的影响，筛选最佳的HcNPV活体增殖方法；并利用生物活性测定法，研究不同病毒保存处理方式、保存时间、保存温度和保存剂对HcNPV活性的影响，明确最佳的保存条件。采用喂食法处理美国白蛾幼虫，利用血球计数板统计HcNPV增殖数量，以半数致死时间（LT₅₀）为指标评价病毒的杀虫活性。【结果】 当饲毒浓度为1×10⁶ OB·mL^﹣1、虫龄为5龄时病毒的增殖量为1.16×10¹⁰ OB/头，显著高于其他供试浓度和龄期；以3龄幼虫作为供试虫龄，饲毒浓度为1×10⁶ OB·mL^﹣1时，研究发现最佳饲毒温度为20 ℃，病毒增殖量达5.06× 10⁹ OB/头；随着持续饲毒时间的延长，病毒增殖量显著降低，从3.42×10⁹ OB/头降低至0.97× 10⁹ OB/头；幼虫饲毒密度为100头/箱（0.05头/cm²）时，病毒增殖量显著高于200-500头/箱，增殖量为4.94× 10⁹ OB/头。不同保存方法对HcNPV杀虫活性具有不同程度的影响。以病毒虫浆法和虫尸干燥粉碎法保存的病毒感染美国白蛾3龄幼虫的LT₅₀显著低于病毒液法和病毒干粉法；当保存时间不超过12个月时，病毒杀虫活性无显著变化；保存温度范围为﹣20-25 ℃时，病毒的杀虫活性未出现显著变化；筛选出最佳的保存剂为蔗糖（50%）和氯化钠（5%），LT₅₀分别为4.94 d和4.97 d。【结论】 在幼虫密度为0.05头/cm²的养虫箱中，使用浓度为1 × 10⁶ OB·mL^﹣1的HcNPV饲喂美国白蛾5龄幼虫一次，20 ℃下可获得最高产量的病毒；感病幼虫虫尸研磨成匀浆，添加蔗糖（50%）或氯化钠（5%）作为辅助剂，置于﹣20 ℃的冰箱内保存，可在12个月内保证HcNPV的最佳活性。