文章标题：三种无形态损伤提取粉螨DNA方法的改进与评估

文章作者：范海页 朱永航 陈慧林 刘璐瑶 赵 薇 曹玉祥 叶长江 孙恩涛
关 键 词：粉螨；DNA提取；无形态损伤；改良Chelex-100法；碱裂解法
文章摘要：

摘  要  【目的】 改进和评估无形态损伤提取粉螨DNA并保留完整凭证标本的方法。【方法】 用改良Chelex-100法，STE法和碱裂解法提取单只椭圆食粉螨Aleurolyphus ovatus基因组DNA，并进行凭证标本回收和形态观察。超微量分光光度计测定DNA的纯度。通过对COⅠ基因的扩增，验证所提取的DNA是否满足PCR扩增。【结果】 3种方法处理后的凭证标本整体保持完整，但碱裂解法处理后，躯体刚毛易脱落，凭证标本透明过度，影响标本的形态鉴定。改良Chelex-100法的A₂₆₀/A₂₈₀比值为1.95，其余两种方法A₂₆₀/A₂₈₀均低于1.8。3种方法所提单只螨DNA均满足PCR扩增，但STE法的扩增效果较差。【结论】 改良Chelex-100法保存凭证标本完整，不影响标本的形态鉴定；提取的DNA纯度高，可以满足PCR扩增和后续相关分子生物学研究，且简单高效，适于单只粉螨DNA的无形态损伤提取。