文章标题：小地老虎硫氧还蛋白过氧化物酶AiTPX1的分子特征及其对杀虫剂胁迫的响应

文章作者：杨浩岚，赵 乐，曹 付，江连强，刘 苏，李茂业，李世广
关 键 词：小地老虎；硫氧还蛋白过氧化物酶；原核表达；杀虫剂；氧化胁迫；表达模式
文章摘要：

摘  要  【目的】 硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX）在昆虫抵御氧化胁迫中具有重要作用。本研究旨在鉴定小地老虎Agrotis ipsilon TPX基因，明确其编码蛋白质的抗氧化能力，阐明TPX基因在小地老虎不同发育期、不同组织以及在3种杀虫剂（高效氯氟氰菊酯、辛硫磷和氯虫苯甲酰胺）胁迫下的表达模式，为深入了解小地老虎TPX基因的生理功能奠定基础。【方法】 利用同源检索技术从小地老虎转录组中鉴定TPX基因，利用大肠杆菌表达重组蛋白并分析其抗氧化能力，使用实时荧光定量PCR技术分析TPX基因的表达模式，使用试剂盒检测幼虫体内H₂O₂的含量变化。【结果】 从小地老虎转录组中鉴定了1个TPX基因的cDNA序列，命名为AiTPX1。根据其编码蛋白质的结构特征，结合系统进化分析结果，确定AiTPX1属于2-Cys家族。在大肠杆菌中成功表达了AiTPX1重组蛋白，该蛋白能够显著提高大肠杆菌在氧化胁迫下的存活率（P<0.05）。AiTPX1基因在小地老虎不同发育期和不同组织中均有表达，但在蛹期和幼虫中肠中表达量最高。使用LC₅₀剂量的高效氯氟氰菊酯、辛硫磷和氯虫苯甲酰胺处理小地老虎幼虫后，幼虫体内H₂O₂含量显著升高，AiTPX1表达水平也显著上升。高效氯氟氰菊酯处理后24 h，AiTPX1表达水平为对照组的8.1倍（P<0.05），辛硫磷和氯虫苯甲酰胺处理后6 h，AiTPX1转录水平分别为对照组的6.5倍和6.0倍（P<0.05）。【结论】 AiTPX1可能具有缓解高效氯氟氰菊酯、辛硫磷和氯虫苯甲酰胺引起的氧化胁迫的功能，从而增强小地老虎幼虫对3种杀虫剂的耐受性。