文章标题：应用环介导等温扩增技术（LAMP）快速检测家蚕核型多角体病毒的研究

文章作者：唐芬芬，杨伟克，邵榆岚，谢道燕，廖鹏飞，杨海，白兴荣
关 键 词：家蚕核型多角体病毒，环介导等温扩增技术，早期诊断，蚕业
文章摘要：由家蚕核型多角体病毒 ( Bombyx mori nucleopoyhedrosis virus, BmNPV )侵染家蚕（Bombyx mori）引起的家蚕核型多角体病 (血液型脓病 )在养蚕生产中发生较为普遍,对蚕业生产造成重大的经济损失。本研究建立了快捷有效的环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)用于快速检测BmNPV，为蚕业生产提供了一个有效检测BmNPV和进行早期诊断的技术。该方法是针对BmNPV的pe38基因的六个区段设计的六条引物用于扩增检测，整个反应在恒温条件63℃下进行25分钟，扩增产物用电泳法和可视法检测（用SYBR Green I染色）。结果显示，LAMP 检测方法的灵敏度是常规PCR方法的100倍，能检测的范围为21个拷贝。另外，用4.86×108 OBs/mL感染4龄起蚕，提取血淋巴DNA为模板，PCR在感染36h后检出病毒DNA，LAMP法能检测感染12h后的样品。