文章标题：间接竞争ELISA法对柞蚕微孢子虫的检测

文章作者：姜义仁1，2王伯阳1孙影1王勇2石生林1杨瑞生1段玉玺2**秦利1**
关 键 词：柞蚕微孢子虫，酶联免疫吸附测定，多克隆抗体，检测
文章摘要：

  柞蚕微孢子虫病是柞蚕唯一的检疫性病害，其致病病原物为柞蚕微孢子虫（Nosema pernyi Ding，Su & Wen），因此，柞蚕微孢子虫的检测对于该病的防治具有重要意义。本文通过制备柞蚕微孢子虫多克隆抗体，建立柞蚕微孢子虫间接竞争ELISA检测法。结果表明，柞蚕微孢子虫多克隆抗体效价为1∶104、浓度为3 mg·mL-1，主要由2条大小约50 ku和25 ku蛋白条带组成，可作为后续试验多克隆抗体材料。间接竞争ELISA法最佳抗原工作浓度为2.0 μg·mL-1微孢子虫孢壁蛋白溶液，最佳抗体工作浓度为兔抗血清按1∶102倍浓度稀释，酶标二抗最佳工作浓度为1∶5×104倍稀释，柞蚕微孢子虫间接竞争ELISA检测法的灵敏度为1.6×105 spores·mL-1。间接竞争ELISA法在柞蚕微孢子虫的检测方面具有一定的应用价值。