文章标题：五龄飞蝗不同发育时间实时定量PCR内参基因的筛选

文章作者：崔 淼** 刘晓健 李 涛 郭亚平 马恩波 张建珍***
关 键 词：飞蝗，实时定量PCR，内参基因，geNorm，NormFinder
文章摘要：

     【目的】 筛选5龄飞蝗不同发育时间的最适内参基因，为相关研究提供基础数据。【方法】 本文选取β-肌动蛋白（β-actin）、延长因子（EF-1α）、3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）、核糖体蛋白49（RP49）、α-微管蛋白（α-Tubulin）和18S核糖体RNA（18S rRNA）基因作为候选内参基因，运用实时定量PCR（qPCR）方法研究各基因在5龄飞蝗不同发育时间的相对表达量，用geNorm与Normfinder软件分析这6个基因表达稳定性。【结果】 geNorm分析结果显示6个内参基因表达稳定度M值顺序为：β-actin（0.3720）＞RP49（0.3750）＞α-Tubulin（0.4030）＞18S rRNA（0.4270）＞EF-1α（0.4970）＞GAPDH（0.6040）。M值越小表示基因表达稳定度越高，同时geNorm软件以标准化因子配对差异值（Pairwise variations）0.15默认为取舍值，由于V2/3=0.098＜0.15，所以最适内参基因数目为2个。运用NormFinder软件也得出相似的结果。【结论】 β-actin与RP49为5龄飞蝗不同发育时间的最适内参基因。