文章标题：基于COⅠ基因的二化螟种群遗传多样性检测方法
文章作者：李 晴1 梁玉勇2 厉建蕾1 程正新2 熊焕保2 刘雨芳3 桂芳艳3 马 伟1
关 键 词：二化螟，转基因水稻，COⅠ，遗传多样性，DGGE
文章摘要：
【目的】 建立二化螟Chilo suppressalis（Walker）遗传多样性检测与分析方法，以研究转基因水稻是否会对二化螟（靶标昆虫）种群遗传多样性产生显著影响。【方法】 从江西、湖南两地采集的二化螟样本中，各随机挑选12只，提取基因组DNA，克隆COⅠ基因的35~ 692 bp 区段（658 bp）进行测序；同时，采用PCR-DGGE技术分析江西3个样本的COⅠ基因遗传多样性，以获取样本群体遗传多样性信息。【结果】 对158个COⅠ基因克隆测序结果分析发现，在658 bp的区段中，共有173个位点存在多态，江西二化螟种群的单倍型多样度（h）为0.820，而湖南二化螟种群的单倍型多样度（h）仅为0.542，江西二化螟COⅠ基因多态要比湖南样本丰富。对COⅠ基因1 278~1 493 bp 区段（266 bp）进行DGGE分析，共获得5条清晰条带，将分析的3只二化螟样本分成两类，该结果与基因测序结果一致。【结论】测序方法可以获得丰富、详细的二化螟目标基因多态信息，但工作量、实验周期及成本较高；DGGE方法虽然信息量较小，但有通量大、实验周期短、成本低等优点，因此该方法适用于二化螟等昆虫大样本种群遗传多样性研究。本研究建立的方法可以为判断转基因水稻是否会对靶标、非靶标昆虫的遗传多样性产生影响提供可靠的分子依据。