《应用昆虫学报》

文章标题:一步法RT-PCR和两步法RT-PCR对蜜蜂病毒诊断研究的比较

文章作者:贾慧茹1** 周 婷1 高夫超2***
关 键 词:蜜蜂病毒,一步法RT-PCR,两步法RT-PCR
文章摘要:

【目的】 探讨适合蜜蜂病毒病诊断的RT-PCR技术。【方法】 从感染蜜蜂以色列急性麻痹病毒、残翅病毒、囊状幼虫病毒、急性麻痹病毒、黑蜂王台病毒以及慢性麻痹病毒的阳性样品中,分别提取这6种病毒的RNA。然后,同时应用一步法RT-PCR和两步法RT-PCR的反应体系对6种病毒扩增,并对两种方法的灵敏性进行比较和分析。【结果】 上述两种方法分别得到158 (IAPV)269 (DWV)342 (SBV)460 (ABPV)536 (BQCV)774 bp(CBPV)的扩增片段,测序结果证实扩增片段符合预期。两步法RT-PCR可检测到更低浓度的病毒颗粒。【结论】 结果表明,该2种方法均可快速、有效地诊断蜜蜂病毒。但两步法RT-PCR灵敏性更高。