《应用昆虫学报》

文章标题:粉蚧标本保存与DNA提取方法的比较

文章作者:魏亦寒1, 2** 郑斯竹2 蔡 平1*** 詹国辉2 高 渊2
关 键 词:扶桑绵粉蚧,保存方式,DNA提取,CTAB法,磁珠法
文章摘要:

【目的】 探讨适合粉蚧的标本保存及DNA提取方法。【方法】 采用改良CTAB法、改良SDS法、GenMagBio动物细胞组织/细胞基因组磁珠法以及GeneJET Genomic DNA纯化试剂盒法4种方法分别对新鲜活体4℃、无水乙醇20℃和无水乙醇4℃ 3种保存方式且保存一年以上的扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis成虫进行DNA提取,并对不同提取方法所获取的DNA纯度与质量浓度进行分析比较验证。  【结果】 3种保存方式中,新鲜活体效果最好,其次为无水乙醇-20℃。无水乙醇4℃效果和无水乙醇20℃无明显区别,均存在一定程度的降解。对于新鲜活体标本,以CTAB法提取的DNA质量最高,其次为GenMagBio磁珠法和SDS法,GeneJET试剂盒法最差;对于无水乙醇20℃4℃保存时间较长的标本,磁珠法提取的DNA质量明显优于其余3种方法。【结论】 无水乙醇20℃可用于粉蚧长期保存,可满足后续分子研究需要;改良CTAB法对新鲜粉蚧成虫DNA提取效果较好,磁珠法对长时间保存DNA存在一定程度降解的粉蚧成虫效果较好。