文章标题：茶尺蠖和灰茶尺蠖内共生菌Wolbachia的分子检测及序列分析

文章作者：周孝贵1, 2, 3** 付建玉2, 3 刘守安2, 3毛腾飞2, 3 肖 强2, 3***
关 键 词：茶尺蠖，灰茶尺蠖，Wolbachia，16S rRNA，ftsZ，wsp，序列分析
文章摘要：

【目的】 对茶尺蠖Ectropis obliqua及其近缘种灰茶尺蠖E. grisescens体内共生菌Wolbachia进行分子鉴定，确定两者体内Wolbachia的感染率及其进化地位，为进一步探讨其对茶尺蠖和灰茶尺蠖的潜在影响提供科学依据。【方法】 采用Wolbachia的16S rRNA、ftsZ和wsp基因特异性引物，通过PCR扩增法检测了我国3个茶尺蠖地理种群（浙江杭州、余杭和江苏无锡）和3个灰茶尺蠖地理种群（浙江新昌、湖北浠水和江西南昌）中Wolbachia的感染情况，并进行测序和序列分析。【结果】 茶尺蠖和灰茶尺蠖都感染了Wolbachia，灰茶尺蠖的Wolbachia感染率为100%，但茶尺蠖的Wolbachia感染率在22%～95%，且PCR产物电泳得到的条带微弱。wsp序列在茶尺蠖和灰茶尺蠖种间、种内无差异；但16S rRNA序列在茶尺蠖和灰茶尺蠖种间、种内差异为0.362%～0.727%之间；茶尺蠖样本未成功扩增出ftsZ序列，灰茶尺蠖样本获得2条ftsZ基因序列差异为1.647%。基于Wolbachia的16S rRNA和wsp基因构建的系统发育树表明，本研究中茶尺蠖和灰茶尺蠖种群所感染的Wolbachia全部属于B组的Pip亚组。【结论】 茶尺蠖和灰茶尺蠖均被B组Pip亚组的Wolbachia感染，但感染率相差很大，这为研究Wolbachia对茶尺蠖和灰茶尺蠖生物学及生态学的影响奠定了基础。