文章标题：家蚕C型凝集素S11的克隆、 表达及功能研究

文章作者：詹明月** 杨佩瑾 饶相君***
关 键 词：家蚕，先天免疫，C型凝集素，免疫受体，凝集
文章摘要：

【目的】 C型凝集素（C-type lectin, CTL）广泛存在于植物和动物中，参与免疫防御反应、发育及细胞信号传导。鳞翅目昆虫中的C型凝集素依据长度和特征功能域可以分成S型、IML型和X型，目前对S型凝集素的功能了解非常有限。本研究对家蚕Bombyx mori L. C型凝集素S11进行了克隆、蛋白表达纯化和初步功能分析。【方法】 基于先前对家蚕基因组中所有C型凝集素序列的生物信息学分析，通过PCR克隆了CTL-S11基因的全长cDNA；利用相关软件对核酸和蛋白质序列进行了比对和分析；通过大肠杆菌原核系统表达纯化重组蛋白；通过RT-PCR和荧光定量PCR研究了该基因的组织表达分布和诱导表达；通过凝集实验检测了重组蛋白对细菌的凝集作用。【结果】 获得了长度为519 bp的CTL-S11全长cDNA序列，编码173个氨基酸，纯化得到分子量约为18 ku，带有组氨酸标签的重组蛋白。RT-PCR表明该基因在中肠、脂肪体、血细胞和表皮都有表达。荧光定量PCR结果表明，细菌喂食或注射家蚕幼虫后，CTL-S11的表达水平在某些时间点有显著上调。凝集实验显示，在钙离子存在的条件下重组蛋白对大肠杆菌和金黄葡萄球菌有明显的凝集作用。【结论】 CTL-S11的表达可以被细菌显著诱导，重组蛋白可以引起细菌的凝集，因此其有可能作为免疫受体参与家蚕对病原微生物的识别。