文章标题：家蚕BmRpt4基因在翅膀发育中的功能研究

文章作者：孙 霞；张 静；印 锦；秦 笙；张国政；李木旺
关 键 词：雏翅；蛋白酶体；CRISPR/Cas9技术；基因组编辑；家蚕
文章摘要：【目的】 研究分析编码蛋白酶体调控复合物亚基基因BmRpt4（Regulatory particle triple-A ATPase4，BGIBMGA010794）在家蚕翅膀发育过程中的功能。【方法】 利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术，将BmRpt4的gRNAs和Cas9 mRNA直接注射到家蚕胚胎中，观察G₀代家蚕个体雏翅率，并分析雏翅个体中BmRpt4基因突变情况。【结果】 经统计，对照组G₀代家蚕个体均表现为正常翅，而实验组注射BmRpt4的gRNAs和Cas9 mRNA后，G₀代约66.7%家蚕个体表现出小翅表型。在分子水平上对小翅表型个体进行检测，发现BmRpt4基因在两个gRNA及其之间位置均有不同长度片段的缺失或者插入，说明在这些突变个体中BmRpt4基因被不同程度的敲除，从而其功能缺失，导致出现小翅表型。【结论】 该研究结果表明编码蛋白酶体调控亚基的BmRpt4基因在家蚕翅膀发育中具有重要作用，为蛋白酶体在生物组织器官发育中调控作用研究提供重要实验依据。