【目的】 克隆获得草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda V-ATP酶（Vacuolar-type proton，ATPase）V₁结构域A、B、C和D亚基的cDNA序列，分析其在草地贪夜蛾不同生长阶段的表达情况，为筛选新型农药的靶点奠定基础。【方法】 利用PCR技术获得草地贪夜蛾V-ATP酶V₁结构域A、B、C和D亚基基因的ORF区域，采用qRT-PCR技术检测各基因在草地贪夜蛾不同发育时期的表达水平。【结果】 A、B、C和D亚基基因均在不同鳞翅目昆虫中高度保守。A-D亚基在草地贪夜蛾各生长阶段均有表达，在幼虫阶段和成虫阶段的表达量均较高，表明V-ATP酶可能影响幼虫生长发育和成虫交配繁殖。卵期和蛹期表达量低，这与卵期和蛹期昆虫各项生命活动低有关。各亚基在各发育时期的表达量存在差异，说明V-ATP酶A、B、C和D发挥不同的功能。【结论】 从草地贪夜蛾中克隆了V-ATP酶V₁结构域A、B、C和D亚基4个基因在草地贪夜蛾不同发育阶段表达量具有差异，推测其对草地贪夜蛾的生长、发育和繁殖具有重要的调控作用。