《应用昆虫学报》

文章标题:萝卜蚜LeATPf基因的克隆及其RNA干扰制剂对萝卜蚜的防治效果研究

文章作者:张 浩;王金彦;赵 杰;陈义娟;蒋杰贤;季香云
关 键 词:RNA干扰;萝卜蚜;三磷酸腺苷合酶f亚基;害虫防治;新型农药
文章摘要:
【目的】 克隆萝卜蚜Lipaphis erysimi (Kaltenbach) 的三磷酸腺苷合酶f亚基(ATP synthases subunit f,LeATPf)基因,并利用RNA干扰技术抑制该基因表达,分析复配RNA干扰剂对萝卜蚜的防治效果,推动以RNA干扰为核心的害虫绿色防控新技术。【方法】 利用同源克隆技术获得萝卜蚜LeATPf基因的全长cDNA,通过RNA干扰技术沉默其基因表达;采用浸叶法测定不同浓度的复配RNA干扰剂对萝卜蚜的杀虫效果,并通过田间小区试验测定RNA干扰剂对萝卜蚜的虫口减退率和田间防治效果。【结果】 萝卜蚜LeATPf基因编码长度为324 bp的cDNA序列,与其它5种蚜虫的ATPf基因同源性在88%以上,且LeATPf基因主要在2龄期萝卜蚜中表达;喷施RNA干扰剂可有效抑制LeATPf基因的表达,且高浓度的RNA干扰剂(200.00 mg/L)对萝卜蚜的室内杀虫效果与吡虫啉处理组无显著差异(P>0.05);在田间试验中,中高浓度的RNA干扰剂(50.00、100.00和200.00 mg/L)在处理后第3和第7天对萝卜蚜的虫口减退率和防治效果与吡虫啉处理组无显著差异(P>0.05),但在处理后14 d对萝卜蚜的虫口减退率和防治效果显著高于吡虫啉处理组(P<0.05)。【结论】 针对LeATPf基因设计并配置的中高浓度的RNA干扰剂对萝卜蚜的防治效果与吡虫啉相当,但是其药效持续性优于吡虫啉;LeATPf基因是开发萝卜蚜RNA干扰制剂的良好靶标基因。