文章标题： 小地老虎隐花色素基因cryptochrome1和cryptochrome2的克隆及mRNA表达分析

文章作者：程 鹏 徐蓬军 高希武 肖海军 付晓伟 等
关 键 词：小地老虎，隐花色素，基因表达
文章摘要：          隐花色素( cryptochrome，cry)是一类广泛存在于生物体内的蓝光和近紫外光受体，介导生物对蓝光的一系
列反应并能导引生物钟。本研究利用RT-PCR 和RACE 方法获得了小地老虎Agrotis ypsilon cry1 和cry2 基因，分别命名为Aycry1 和Aycry2。Aycry1 基因(GenBank No． JQ616846)读码框1 587 bp，编码528 个氨基酸，预测分子量60. 5 ku，等电点6. 68。Aycry2 基因(GenBank No． JQ616847)读码框2 439 bp，编码812 个氨基酸，预测分子量92. 1ku，等电点8. 45。保守区分析表明:Aycry1 和Aycry2 均含有FAD 结合位点的PHR 区域和C 末端保守区域。氨基酸序列比对分析表明，小地老虎的AyCRY1 和AyCRY2 分别与其它鳞翅目昆虫的CRY1 和CRY2 有很高的一致性，其中与棉铃虫Helicoverpa armigera 的一致性最高，分别为89. 5% 和73. 8% 。NJ 聚类分析结果表明昆虫含有两类CRY，即CRY1 和CRY2，它们可分别以目为单位进行聚类，其中AyCRY1 和AyCRY2 分别与其它鳞翅目昆虫的CRY1 和CRY2 聚到一起。以室内饲养的小地老虎为材料，以3 h 为间隔检测了Aycry1 和Aycry2 的24 h 昼夜表达 变化，结果表明这2 个基因均表现出一定的昼夜节律性。Aycry1 和Aycry2 表达趋势白天高于晚上，表达峰值出现在ZT7( Zeitgeber time)。方差分析其昼夜波动差异不显著。