文章标题：利用噬菌体展示技术筛选Cry2Ab毒素受体表位的方法

文章作者：齐佳，刘晨曦，吴孔明**
关 键 词：噬菌体展示，表位筛选，Cry2A
文章摘要：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)产生的内毒素具有杀虫活性，Cry2Ab毒素作为 Bt棉花的杀虫活性蛋白，其在靶标昆虫体内的结合受体及作用位点尚不清楚，本研究采用噬菌体展示(phage display)的方法，经 4轮的“吸附 —洗脱—扩繁”筛选，并对阳性克隆所携带的外源 DNA片段进行序列测定后，得到 2段能够与活化 Cry2Ab毒素相互作用的多肽序列，通过酶联免疫结合试验(ELISA)进一步证明，这 2段多肽序列与活化 Cry2Ab毒素具有较高的亲和力和特异性，结果表明，利用该方法能够由噬菌体随机肽库中高效捕获亲和序列，筛选到与活化 Cry2Ab毒素具有高亲和力的多肽，该序列可以模拟 Cry2Ab毒素的受体表位，为进一步研究 Cry2Ab毒素作用机制奠定了基础，并为今后田间抗性基因频率检测，以及毒素—受体作用机制研究工作提供更有力的技术支持。