文章标题：意大利蝗Calliptamus italicus卵巢基因表达RT-qPCR定量内参基因的筛选

文章作者：许亚丽，董彬，丁国婵，桑迪，季荣，王晗
关 键 词：意大利蝗；内参基因；表达稳定性；卵巢发育；实时荧光定量PCR
文章摘要：【目的】 意大利蝗Calliptamus italicus 是新疆草原重要害虫，研究其繁殖相关基因的生物学功能，对于害虫防控靶标筛选具有重要意义。为研究意大利蝗雌虫卵巢发育过程中功能基因的表达动态及调控功能，首先要选择适合的内参基因，以确保RT-qPCR定量结果的准确性。【方法】 选择β-actin、EF1-a、β-tubulin、α-tubulin、GAPDH、SDHA、GST、RPL32和TBP为候选内参基因，采用RT-qPCR技术检测其在意大利蝗卵巢发育过程中的表达水平，通过GeNorm、 NormFinder、BestKeeper和RefFinder评估其表达稳定性。以Hex2、VgR、Sox9a和Cyp6bg10为目标基因，验证候选基因在不同发育阶段卵巢组织中的表达稳定性。【结果】 GeNorm、NormFinder和BestKeepe分析结果表明，β-tubulin、RPL32、GAPDH、EF1-α基因均表现出良好的稳定性。通过GeNorm判断配对变异值确定的内参基因最佳数目，结合RefFinder软件综合分析，表明意大利蝗卵巢发育过程中最优内参组合为RPL32和EF1-α。【结论】 本研究获得意大利蝗卵巢发育过程中表达最稳定的内参基因组合，可用于后续的基因表达定量研究。