刊期:双月刊
主管单位:中国科学院
主办单位:中国科学院动物研究所,中国昆虫学会
地址:北京市朝阳区北辰西路1号院5号中国科学院动物研究所
邮编:100101
电话:010-64807137
传真:010-64807137
E-Mail:entom@ioz.ac.cn
刊号:ISSN 2095-1353
        CN 11-6020/Q
国内发行代号:2-151
国际发行代号:BM-407
发行范围:国内外公开发布
定价:138元/册
定价:828元/年
银行汇款:中国工商银行北京海淀西区支行
户名:中国科学院动物研究所
帐号:0200 0045 0908 8125 063

您所在位置:首页->过刊浏览->2009年46卷第3期



不同赤眼蜂品系ISSR-PCR条件优化及分子鉴定
Optimization of ISSRPCR analyses and molecular identification of different strains of Trichogramma spp
裴毅夫,李正西,王素琴,康总江
点击:2505次 下载:0次
DOI:
作者单位:中国农业大学农学与生物技术学院
中文关键词:赤眼蜂;ISSR-PCR;品系鉴定和筛选
英文关键词:Trichogramma,ISSR-PCR,identification and screening of strain
中文摘要:
赤眼蜂Trichogramma不同品系在寄生能力等生物学特性上存在差异,而这些差异可能被用于优良品系的筛选。通过优化影响赤眼蜂不同品系ISSR-PCR的主要参数,建立适于鉴别赤眼蜂不同品系的ISSR-PCR 反应体系和扩增程序。在20 μL反应体系中,各反应物的最适含量为10×PCR Buffer 2.0 μL,MgCl2 2. 0 μL(25 mmol/L),dNTPs 1.6μL(2.5 mmol/L each),正反向引物各1 μL(25 μmol/L),DNA模板1.0μL,Taq酶0.4 μL(2.5 U/μL),和ddH2O。ISSR-PCR的扩增程序为:95℃预变性5 min,94℃变性50 s,52℃退火1 min,72℃延伸1 min 20 s,35个循环,72℃延伸10 min。结果表明,在上述优化条件下,采用ISSR-PCR可实现对7个赤眼蜂优良品系的分子鉴定。该研究对于赤眼蜂优良品系的筛选具有潜在的应用价值。
英文摘要:
Different Trichogramma strains are differentiated from each other in biological characteristics, such as parasitic capability, which might be used for screening of superior Trichogramma strains. Here Inter-Simple Sequence Repeats (ISSR)-PCR was used to investigate the genetic variation of 7 candidate strains, and the molecular markers specific to different strains were subsequently identified. By optimizing the main parameters, the optimal ISSR-PCR reaction conditions for Trichogramma were firstly established. The results showed that the optimum concentrations of different reagents in a total of 20 μL volume were: 2.0 μL MgCl2 (20 mmol/L), 1.6 μL dNTPs (.5 mmol/L each), 1 μL ISSR primer (10 μmmol/L), 1.5 μL genomic DNA and 0.4 μL Taq DNA polymerase (2.5 U/μL). The suitable PCR procedures were determined to be: pre-denaturing at 95 for 5 min, followed by 35 cycles of denaturing at 94 for 50 s, annealing at 52 for 1min and extension at 72 for 1 min 20 s, with a final extension at 72 for 10 min. Under the optimal conditions, the 7 Trichogramma strains tested could be discriminated by using ISSR-PCR. It is therefore suggested that this technique is helpful in identification and screening of Trichogramma strains.
读者评论

      读者ID: 密码:   
我要评论:
版权所有©2025应用昆虫学报》编辑部 京ICP备10006425号
本系统由北京菲斯特诺科技有限公司设计开发
您是本站第10280049名访问者